CONCENTRADO DE LEUCOCITOS Y RECUENTO DE ARNETH

Lo que queremos conseguir es un concentrado de leucocitos de una muestra para luego poder contar sus lobulaciones. Se hace una media aritmética con el numero de lobulaciones que tienen los neutrofilos que vayamos viendo en la muestra.

Los materiales que vamos a usar en esta práctica son los siguientes: vaso de precipitado, portaobjetos, pipeta pasteur, tubos de ensayo, papel film, microscopio con aceite de inmersión, papel de filtro, calculadora.

Los reactivos y muestras son: reactivos para la tinción del panóptico y sangre anticoagulada.

Procedimiento:

Lo primero que debemos hacer es la centrifugación de la sangre para poder conseguir la buffy coat ( la capa leucocitaria que vamos a necesitar) y para ello podremos dos tubos, uno que usaremos y el otro para poder compensar la centrifugadora. la pondremos durante 15 minutos a 1500rpm.

Una vez tengamos la centrifugación, eliminaremos el sobrenadante y lo colocamos en otro tubo, y con la pipeta pasteur y con mucho cuidado cogemos la capa leucocitaria que es la que nos interesa, con mucho cuidado para no llevamos nada de las otras capas.

con la buffy coat haremos un frotis y a continuación haremos un panóptico con él, los pasos los podemos ver en la practica dedicada a ella publicada anteriormente.

una vez que tenemos la tinción realizada y seca procedemos a visualizar el porta en el microscopio con objetivo de 100x y con una gota de aceite de inmersión.

procedemos a contar unos 50 neutrófilos (más o menos), e iremos contando sus lobulaciones para así poder hacer nuestro recuento de Arneth.

tipo 1=0 lobulaciones

tipo 2=2 lobulaciones

tipo 3=3 lobulaciones

tipo 4=4 lobulaciones

tipo 5=5 lobulaciones

deberemos anotar tantos los tipos que veamos, como las lobulaciones. y seguidamente podremos hacer los calculos.

Nº lobulos contados/Nº neutrófilos vistos

Resultados:

los valores normales son de 1,9-3 y a cuanto menor número, la desviacion será a la izquierda.